デビュー年：２００２（平成１４)年
運行区間：相鉄本線、いずみ野線
車両系列番号はついに１００００の大台へ。
近年、大手私鉄各社では車両調達コストの削減などを目的とし、通勤型電車の基本設計を他社と同一にする傾向にあるが、相模鉄道の１００００系はその先駆けともいえる系列である。ＪＲ東日本のＥ２３１系をベースにした車両であり、前面デザインを変更した以外はほぼ同一（ただし車体幅は、オリジナルより車幅が20mm短い）。のち、東急５０００系や都営地下鉄10-300形などもＥ２３１系をベースとしているため、これらの車両とも兄弟分とも言える。
意外にも相模鉄道では初めてのステンレス車体の車両で、種別・行先表示に英文・ローマ字表記を付加したのも初。
また、登場時のラインカラーは、新６０００系のイメージを踏襲している。
車両の詳細については、
ＪＲ東日本Ｅ２３１系のページを参照。
なお、ＪＲ東日本との直通運転を予定しており、実現後に１００００系がどのような形で運用されるのか、注目されている。
